核磁樣品處理非水溶劑四甲基硅烷

常用內標物

氫譜：非水溶劑四甲基硅烷（TMS）水溶液為2,2-二甲基戊硅烷-5-磺酸鈉(ＤＳＳ)

碳譜：四甲基硅烷（ＴＭＳ）或者氘代試劑中的碳峰

TMS優點：

TMS分子中12個1H處于完全相同的化學環境，只產生一個尖峰，少量的TMS即可測出NMR信號；屏蔽強烈，共振吸收峰位于譜圖最右端。與有機化合物中的1H峰不重疊；化學惰性；易溶于有機溶劑；沸點低（27℃），樣品易回收。


硼譜：乙醚三氟化硼或者三甲氧基硼

磷譜：８５％磷酸（但只能作為外標）

鋰譜：４Ｍ高氯酸鋰溶液

鈉譜：1M氯化鈉溶液

硅譜：四甲基硅烷，但在低頻區則用四乙基正硅酸酯

常用同位素核有關物理參數

a 磁旋比的單位是107弧度/特斯拉/秒

b 共振頻率以1H頻率為100MHz作參考

c 檢測靈敏度以1H為1作為參考，并考慮了同位素的天然豐度。


請大家記?。簾o論內標還是外標，實際化學位移值隨溫度變化而變化，而標準物本身就受溫度的影響。如溫度每改變30K，TMS質子共振信號將變化0.1 ppm。因此，如果做變溫試驗，最好標明詳細的實驗過程。

準備樣品



1.  首要的是保證產物的純度，雜質峰肯定讓你的圖不好看。

2. 拿住樣品管是要拿住上部。

3.  實驗過程中的溶劑殘留也是影響圖譜質量的很大因素。常見的有石油 醚、乙酸乙酯等溶劑。

4. 對于氫譜，3 到 10 毫克樣品足夠。對于分子量較大的樣品，有時需要濃度 更大的溶液。但濃度太大會因飽和或者粘度增加而降低分辨率。

5. 對于碳譜和雜核 譜，樣品濃度至少為氫譜的 5 倍（一般在 100 毫克左右）。

6. 對于二維實驗，為了獲得較好的信噪比，樣品濃度必須夠。根據經驗，25 毫克樣品足以完成所有實驗，包括氫碳相關 HMBC 實驗。如果樣品只有 1 到 5 毫克，只能完成同核氫氫相關實驗，與碳相關的實驗至少需要過夜。保持樣品高度或者體積一致。這將減少換樣品后的勻場時間。對于 5 毫米核 磁管，樣品體積應為 0.6 毫升或者樣品高度為 4 厘米。

7. 保持樣品高度或者體積一致。這將減少換樣品后的勻場時間。

8. 蓋上樣品管，使用封口膜密封減少蒸發。

選擇合適的氘代溶劑



譜議靠氘信號鎖場和勻場，一般要求：惰性，低沸點，價格盡量便宜首要規則，氘代原子越多，價格越高。

溶解度：越大越好，以增加實驗的靈敏度。

溶劑信號對樣品的干擾：越小越好，盡量不與譜峰范圍重疊。

溫度可靠性：在實驗溫度下不會揮發或凝固，溶解度不會受太大影響。比如，D6-DMSO凝固點18.4度,如果實驗室不是恒溫的,冬天凝固很正常溫度低會發生凝固。

粘滯性：粘滯性越小，分辨率越好

水含量：幾乎所有核磁溶劑里都有痕量或更多的水，水的存在會降低譜圖的質量。

帶活潑氫的試樣盡量選擇不含活潑氫的試劑，避免該峰因氫氘交換而無 法在圖譜中表現出來

適當的芳香氘代溶劑有可能簡化圖譜

所需樣品量

在核磁共振實驗中，樣品的量控制也是一門學問，有的產品是多步合成的，很寶貴，例如全合成產品。對于氫譜，3到10毫克樣品足夠。對于分子量較大的樣品，有時需要濃度更大的溶液。但濃度太大會因飽和或者粘度增加而降低分辨率。對于碳譜和雜核，樣品濃度至少為氫譜的5倍（一般在20-500毫克左右）。

對于二維實驗，為了獲得較好的信噪比，樣品濃度必須夠。根據經驗，25毫克樣品足以完成所有實驗，包括氫碳相關HMBC實驗。如果樣品只有1到5毫克，只能完成均核氫氫相關實驗，是與碳相關的實驗至少需要過夜。保持樣品高度或者體積一致。這將減少換樣品后的勻場時間。對于5毫米核磁管，樣品體積應為0.6毫升或者樣品高度為4厘米。


關于樣品純化和譜圖處理

要想圖譜漂亮，首要的是保證產物的純度，雜質峰肯定讓你的圖不好看。

1. 過柱子，過柱子，重要的事情說三遍。再好分都過根柱子，過柱子的時候勤換瓶子，產物點分幾瓶接，取中間的旋干送核磁。

2. 過柱子的溶劑最好重蒸再用。國產石油醚里無法通過旋蒸除去的低極性、高沸點雜質在過柱子的過程中會混到產物當中，讓你生不如死，都不知道怎么從產物里把這些個破玩意除掉，怎么打都是雜質。（最實用和重要的一條）

3. 國外正己烷多一點，可以的話用正己烷，正己烷相對而言比較干凈...

4. 防濺球用棉花堵起來（防止旋完放氣的時候壓力升太快固體噴了）

5. 產物注意干燥后再打核磁，不干燥的話殘余溶劑和水分就會出雜峰。氘代溶劑里有水出個峰很正常，但被產物里的水混進去以后水峰變得巨高，那就痛苦了……

6. 產物旋蒸后可以考慮最后用真空泵抽一下，這樣會使溶劑峰更低。二氯石油醚，那么抽個半小時就差不多沒了；如果有乙酸乙酯，DMF，乙腈甲醇等沸點比較高的溶劑，先高溫把溶劑旋干凈，然后趁熱抽，再常溫抽幾個小時，基本上溶劑峰就沒了。水峰一般也比較容易抽沒。

7. 注意潛在的油脂類雜質：如果東西比較少，處理的時候又不太注意，在氫譜上位移1.2和0.8會有兩個油脂的雜峰，很影響美觀。這種情況一般可以用石油醚洗兩次產物，然后抽干，油脂大部分會被石油醚洗掉。

8.  氘代試劑平時可以放在干燥箱里，防止引入水分。

9. 取氘代溶劑記得用玻璃吸管，不要用塑料吸管，有些人喜歡用塑料洗瓶的溶劑來溶解瓶口粘到的樣品什么的，這是非常非常不可取的。

10. 打核磁的量不要加得太少或者太多，10mg左右比較合適，少于2mg雜質峰和各種溶劑峰會讓你生無可戀。 碳譜越多越好（但幾十毫克足夠了）如果不夠的話就提交500M核磁多掃幾個小時。

11. 選擇合適的氘代試劑，一方面氘代試劑的峰不能跟產物峰重合，如果想要很漂亮的峰的話，氘代試劑的峰和產物峰距離最好稍微大一些，不要影響到產物峰的積分；另一方面，對產物要有足夠的溶解度，如果產物溶得不好，掃出來的產物峰信號弱，要在軟件里拼命拉高才能看見的話，那個圖的基線部分會無比的丑陋。

12. 最后是核磁的圖像處理，我以前處理的時候會把線條從暗紅色換成黑色，然后加粗，感覺看起來要 光滑平整一些，好看。不過我很懶，鑒于文章里放核磁圖譜除了增加引用以外沒啥用，我都懶得在文章里放圖，自己看著沒問題就行了。文章里只放峰位和幾重峰和積分相關的數據。